技术服务

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IP-MS

免疫沉淀和质谱联用(IP-MS,Immunoprecipitation-Mass Spectrometry),是一种基于抗体和抗原特异性结合的原理,研究蛋白与蛋白相互作用的方法。将细胞裂解液与结合有目的蛋白抗体的磁珠进行孵育,体系中能与目的蛋白相互作用的蛋白,通过特异性结合而与其他蛋白组分分离开来,再通过洗脱去掉没有与目的蛋白结合的杂蛋白,从而获得与目的蛋白相互作用的靶蛋白。

将IP免疫沉淀获得的靶蛋白,通过质谱技术进行后续鉴定,即IP-MS分析。通过液相色谱串联质谱技术可以富集与目的蛋白相互作用的靶蛋白,并对其进行定性鉴定,不仅可以用于验证已知的相互作用的蛋白,还可以用于寻找能与目的蛋白相互作用的未知的蛋白质分子。

工作流程

利用LC-MS进行蛋白质鉴定,主要流程是先对蛋白进行定量后,通过还原烷基化打开蛋白三维结构,酶解后抽提出肽段,再运用质谱技术得到这些肽段的质谱图,最后运用蛋白质鉴定软件,鉴定出样品中的蛋白质。

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